Nije Coronavirus (SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Fluertsscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Product name 】Nije Coronavirus (SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit (Fluorescent RT-PCR Probe Metoade)
【Packaging specifications 】25 Tests / Kit
【Intended usleeftyd】
Dizze kit wurdt brûkt foar de kwalitative detectie fan nukleïnesûr fan nij coronavirus yn nasopharyngeale swabs, orofaryngeale (keel) swabs, anterior nasale swabs, mid-turbinate swabs, nasale waskjen en nasale aspiraten fan yndividuen dy't fertocht wurde fan COVID19 troch har sûnenssoarch. De deteksje fan ORF1ab- en N-genen fan it nije coronavirus kin brûkt wurde foar helpdiagnoaze en epidemiologyske tafersjoch fan nije ynfeksje fan coronavirus.
【Principles of the procedure 】
Dizze kit is ûntworpen foar spesifike TaqMan-probes en spesifike primers ûntworpen foar it nije coronavirus (SARS-Cov-2) ORF1ab en N-gen-sekwinsjes. De PCR-reaksje-oplossing befettet 3 sets fan spesifike primers en fluorescent probes foar spesifike detectie fan doelen, en in ekstra set fan spesifike primers en fluorescent probes wurdt brûkt as de ynterne standertkontrôle fan 'e kit foar it opspoaren fan endogene housekeeping-genen.
It testprinsipe is dat de spesifike fluorescent probe wurdt digested en degradearre troch de exonuclease aktiviteit fan de Taq enzyme yn de PCR reaksje, sadat de reporter fluorescent groep en de quenched fluorescent groep wurde skieden, sadat de fluorescence monitoring systeem kin ûntfange in fluorescent sinjaal, en dan Troch de ferriking effekt fan PCR amplification, it fluorescence sinjaal fan de sonde berikt in set drompel wearde-Ct wearde (Cycle drompel). Yn it gefal fan gjin doelamplikon is de reportergroep fan 'e sonde ticht by de quenching-groep. Op dit stuit komt de oerdracht fan fluorescence-resonânsje-enerzjy foar, en de fluoreszinsje fan 'e reportergroep wurdt útsteld troch de quenching-groep, sadat it fluorescent sinjaal net kin wurde ûntdutsen troch it fluorescent PCR-ynstrumint.
Om it gebrûk fan reagenzjes tidens de test te kontrolearjen, is de kit foarsjoen fan positive en negative kontrôles: de positive kontrôle befettet it rekombinante plasmide fan 'e doelside, en de negative kontrôle is destillearre wetter, dat wurdt brûkt om miljeufersmoarging te kontrolearjen. It is oan te rieden om in positive kontrôle en in negative kontrôle tagelyk yn te stellen by it testen.
【Main components 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | Components | |
| Name | Specification | Quantity | Quantity | |
| Posityf kontrôle | 180 μL/flesje | 1 | 1 | Keunstmjittich konstruearre plasmiden, Destillearre wetter |
| Negatyf kontrôle | 180 μL/flesje | 1 | 1 | Destillearre wetter |
| SARS-Cov-2 Mix | 358,5 μL/flesje | 1 | / | Spesifike primerpearen, spesifike deteksjefluorescentprobes, dNTP's, , MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Destillearre wetter, ensfh. |
| Enzymmix | 16,5 μL/fles | 1 | / | Taq-enzymen, reverse transkriptase, UNG-enzymen, ensfh. |
| SARS-Cov-2 Mix (lyofilisearre) | 25 tests / flesje | / | 1 | Spesifike primer-pearen, spesifike deteksje fluorescent probes, dNTP's, Taq-enzymen, reverse transkriptase, destillearre wetter, ensfh. |
| 2x Buffer | 375 μL/flesje | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, destillearre wetter, ensfh. |
Noat:(1) De komponinten yn ferskate batchkits kinne net wurde mingd of útwiksele.
(2) Tariede jo eigen reagens: Nucleic acid ekstraksje kit.
【Storage conditions en expiration date 】
For BST-SARS-25:Ferfier en opslaan by -20 ± 5 ℃ foar in lange tiid.
For BST-SARS-DR-25:Ferfier by keamertemperatuer. Bewarje by -20 ± 5 ℃ foar in lange tiid.
Foarkom werhelle freeze-thaw-syklusen. De jildigensperioade is foarearst ynsteld foar 12 moannen.
Sjoch it label foar de datum fan fabrikaazje en gebrûk.
Nei de earste iepening kin it reagens wurde opslein by -20 ± 5 ° C foar net mear as 1 moanne of oant it ein fan 'e reagensperioade, hokker datum ek earst komt, om werhelle freeze-taai-syklusen te foarkommen, en it oantal reagensfries. - thaw cycles moatte net mear as 6 kear.
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements 】
1.Applicable sample type: Extracted nucleic acid oplossing.
2.Sample opslach en ferfier: Bewarje by-20 ± 5 ℃ foar 6 moannen.Freeze en ûntdekke de samples net mear as 6 kear.
【Testing method】
1.Nucleic acid extraction
Selektearje in gaadlike nukleïnezuurekstraksje kit om virale nukleïnesûr te ekstrahearjen, en folgje de oerienkommende kitynstruksjes. It is oan te rieden om in nukleïnezuurekstraksje- en suveringskit te brûken produsearre troch Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd.
2. Reaction reagent preparation
2.1 For BST-SARS-25:
(1) Fuortsmite de SARS-Cov-2 Mix en Enzyme Mix, folslein smelten by keamertemperatuer mix yngeand troch Vortex apparaat en dan koart centrifuge.
(2) 16.5uL Enzyme Mix waard tafoege oan 358.5uL SARS-Cov-2 Mix en mingd yngeand om de mingde reaksje oplossing te krijen.
(3) Bereid in skjinne 0.2 mL PCR octale buis en markearje it mei 15uL fan 'e boppesteande mingde reaksje oplossing per put.
(4) Add 15 μL fan suvere nucleic acid oplossing, de positive kontrôle en de negative kontrôle, en soarchfâldich bedekke de octale buis cap.
(5) Mix goed troch inverting upside down, en fluch centrifuge te konsintrearjen de floeistof oan 'e boaiem fan' e buis.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
(1) Foegje 375ul 2x buffer ta oan SARS-Cov-2 Mix ((lyofilisearre) om de reaksjemix te meitsjen. Mix yngeand troch pipetterjen en dan koart sintrifugerje. lange termyn opslach.)
(2) Bereid in skjinne 0.2 mL PCR octale buis en markearje it mei 15μL reaksjemix per put.
(3) Add 15μL fan suvere nucleic acid oplossing, de positive kontrôle en de negative kontrôle, en soarchfâldich bedekke de octale buis cap.
(4) Mix goed troch inverting upside down, en fluch centrifuge te konsintrearjen de floeistof oan 'e boaiem fan' e buis.
3. PCR amplification (Sjoch asjebleaft de ynstruminthantlieding foar operaasjeynstellingen.）
3. 1 Plak de PCR 8-buis yn 'e sample keamer fan it fluorescent PCR ynstrumint, en set de stekproef te testen, de positive kontrôle en de negative kontrôle neffens de folchoarder fan laden.
3.2 Fluorescensdeteksjekanaal:
(1) ORF1ab-gen selekteart it deteksjekanaal fan FAM (Reporter: FAM, Quencher: Gjin).
(2) N-gen selekteart it deteksjekanaal fan VIC (Reporter: VIC, Quencher: Gjin).
(3) Ynterne standertgen selekteart it deteksjekanaal fan CY5 (Reporter: CY5, Quencher: Gjin).
(4) De Passive Reference is ynsteld op ROX.
3.3 PCR programma parameter ynstelling:
| Stap | Temperatuer (℃) | Tiid | Oantal syklusen | |
| 1 | Reverse transkripsje reaksje | 50 | 15 min | 1 |
| 2 | Taq enzyme aktivearring | 95 | 2,5 min | 1 |
| 3 | Taq enzyme aktivearring | 93 | 10 s | 43 |
| Annealing útwreiding en fluorescence akwisysje | 55 | 30 s | ||
Nei it ynstellen, bewarje it bestân en fier it reaksjeprogramma út.
4.Results analysis
Nei't it programma einiget, wurde de resultaten automatysk bewarre, en de amplifikaasjekromme wurdt analysearre. De amplification curve is ynsteld op de ynstrumint standert drompel.
【Explanation of test results 】
1. Bepale de jildichheid fan it eksperimint: De positive kontrôle FAM, VIC kanaal moat hawwe in typyske amplification kromme, en de Ct wearde is oer it generaal minder as 34, mar kin fluktuearje fanwege ferskillende drompel ynstellings fan ferskillende ynstruminten. De negative kontrôle FAM, VIC kanaal moat wêze net-amplified Ct. Der wurdt ôfpraat dat der tagelyk oan boppesteande easken foldien wurde moat, oars is dizze test ûnjildich.
2. Resultaat oardiel
| FAM / VIC kanaal | Oardiel resultaat |
| Ct＜37 | Sample test is posityf |
| 37≤Ct＜40 | De amplification kromme is S-foarmige, en fertochte samples moatte wurde opnij ûndersocht; as de útkomsten fan it wereksamen konsekwint binne, wurdt it beoardiele as posityf, oars is it negatyf |
| Ct≥40 of gjin fersterking | Sample test is negatyf (of ûnder de legere limyt fan kit detection) |
Opmerking: (1) As sawol it FAM-kanaal as it VIC-kanaal tagelyk posityf binne, wurdt de SARS-Cov-2 bepaald om posityf te wêzen.
(2) As it FAM-kanaal of VIC-kanaal posityf is en it oare kanaal negatyf is, moat de test wurde werhelle. As it tagelyk posityf is, wurdt it beoardiele as SARS-Cov-2 posityf, oars wurdt it beoardiele as SARS-Cov-2 negatyf.
Related produkten
-
COVID-19 IgM / IgG Antibody Detection Kit
COVID-19 IgM/IgG Antibody Detection Kit (Colloidal Gold Immunochromatography Method) Produkthantlieding 【PRODUCT NAME】COVID- 19 IgM/IgG Antibody Detection Kit （Colloidal Gold Immunochromatography Method) 【PAKKINGSSPESIFIKASJES】Kit 1, 1 Tests ABSTRACT】 De nije coronaviruses hearre ta it β-genus. COVID-19 is in akute respiratoire ynfeksjesykte. Minsken binne oer it algemien gefoelich. Op it stuit binne de pasjinten ynfekteare troch it nije coronavirus de wichtichste boarne ...
-
Nucleic acid ekstraksje of suvering Kit
Nucleic Acid Extraction or Purification Kit of opslein by -20 ℃. It monster moat wurde ferfierd mei 0 ℃ curling. Yntroduksje De Nucleic Acid Extraction or Purification Kit (Magnetic Beads Method) is ûntworpen foar de automatisearre suvering fan RNA en DNA út lichemsfloeistoffen (lykas swabs, plasma, serum) mei help fan automatisearre nukleïnezuurekstraksje-ynstruminten. Magnetyske partikeltechnology leveret heechweardich DNA / RNA dat geskikt is foar ...
-
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit （Immunochromatogr...
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (Immunochromatography Method) Produkt Hânlieding 【PRODUCT NAME】 SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit （Immunochromatography Method) 【PAKKINGSSPESIFIKASJES】 1 Test/Kit 【ABSTRACT】 De nije genus fan coronavirus. COVID-19 is in akute respiratoire ynfeksjesykte. Minsken binne oer it algemien gefoelich. Op it stuit binne de pasjinten ynfekteare troch it nije coronavirus de wichtichste ...
-
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (Immunochromatography Method) Produkt hânboek 【PRODUCT NAME】 SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit （Immunochromatography Method) 【PACKAGING SPESIFIKASJES】 1 Test/Kit ,25Tests/Kit , 1Kt 00Kit STRA nije coronaviruses hearre ta it β-geslacht. COVID-19 is in akute respiratoire ynfeksjesykte. Minsken binne oer it algemien gefoelich. Op it stuit binne de pasjinten ynfekteare troch it nije coronavirus de wichtichste boarne fan ynfeksje; asymptomatysk ynfekteare minsken ...